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RNase Inhibitor, Murine

 
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描述:

特性

■  抑制常见真核 RNase
■ 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
■  在较宽的 pH 范围内均有活性 (pH 5-8)
■  cDNA 合成和 RT-PCR
■  体外转录/翻译
■  酶催化的 RNA 标记反应
 

概述

小鼠 RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白,分子量为 50 kDa,可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。
它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸
酶、RNaseH 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,该抑制剂不会抑制
聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶 
(SP6、T7 或 T3) 。

重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱氨酸,已证实,人源中的半胱氨酸能导致抑制剂对氧化敏感甚至
失活。因此,小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比,抗氧化能力显著提高,且在 DTT 浓
度较低 (< 1 mM)  时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT的反应中更具优势,如实时 RT-PCR。

来源

携带有鼠源 RNase 抑制剂基因的 E. coli 菌株。

质量保证

无核酸内、外切酶和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需要的小鼠 RNase 抑制剂的量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2,3' -环单磷酸盐的水解来进行。

浓度

40,000 units/ml。


注意事项:

  1. Since ribonucleases typically retain activity under denaturing conditions, care must be taken to avoid denaturing RNase Inhibitor molecules which have complexed with a ribonuclease. To prevent the release of active ribonuclease, temperatures greater than 50°C and high concentrations of urea or other denaturing agents should be avoided.
  2. The recommended concentration of RNase Inhibitor in a reaction is 1 unit/μl. During assembly of a reaction, RNase Inhibitor should be added before other components that are a possible source of RNase contamination (i.e. enzymes, plasmid from a mini prep.)


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