T7 Endonuclease I

• 产品编号：M0302L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0302L
• 产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 核酸酶
• 应用分类：

描述：

特性

■ 识别错配 DNA

■ 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA

■ 检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA

■ 随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆

概述

T7 核酸内切酶 I 识别并切割不完全配对DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链
DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。该酶切割错配碱基 5' 端的第一、第二或第三个磷酸二
酯键。

来源

C-端带有硫酯键的截短型无活性的 T7 核酸内切酶 I (tT7 Endo I) 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 融合表达。将合成的多肽 (由截短型的 T7 核酸内切酶 I 缺失的氨基酸序列构成) 与上述携带硫脂键的 tT7 Endo I 在体外进行连接反应，得到全长且有活性的 T7 核酸内切酶 I。

反应条件

1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，37℃ 温育。

质保声明

T7 核酸内切酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系，37℃ 条件下，1小时将 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC (AT) *
转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC (AT) 来自 pUC19，在其 EcoRI 和 PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。

浓度

10,000 units/ml。

热失活

无。

原厂资料：

注意事项：

T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物时，必须控制酶量和反应时间。

反应温度超过 42 ℃ 时，会增加非特异性核酸酶活性。