Endonuclease VIII

• 产品编号：M0299L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0299L
• 产品分类：克隆 > DNA/RNA修饰酶 > 核酸酶
• 应用分类：

描述：

特性

■  单细胞凝胶电泳 (彗星试验)
■  碱洗脱
■  碱解旋

概述

大肠杆菌核酸内切酶 Ⅷ 既有 N -糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3' 和 5' 端切割磷酸二酯键，产生 5' 磷酸和 3' 磷酸末端。能被核酸内切酶 Ⅷ 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 Ⅷ 与核酸内切酶 III 的活性相似，但核酸内切酶 Ⅷ 具有 β 和 δ 裂解酶活性，而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。

来源

克隆有 nei 基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X Endonuclease VIII 反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl，75 mM  NaCl，1  mM  EDTA（pH 8.0 @25°C）]，37°C 温育。

质保声明

核酸内切酶 Ⅷ 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。

*AP 位点的创建方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG) 处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

彗星试验的推荐稀释倍数

1∶10⁴〜1∶10⁵。

浓度

10,000 units/ml。

热失活

75°C 10分钟。

原厂资料：