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Uracil-DNA Glycosylase (UDG)

 
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描述:

概述

E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化尿嘧啶从含尿嘧啶的 DNA 上释放。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。

来源

克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。

应用

在 37 ℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95 ℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95 ℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。

反应条件

1X UDG 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl,1mM EDTA,1 mM DTT (pH 8.0)]。37°C 温育。

质保声明

尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA (104-105 cpm/μg) 的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

浓度

5,000 units/ml。

热失活

无。

 


注意事项:

使用注意

UDG 在较广的 pH 范围内均有活性,最适 pH 是 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度
(>200 mM) 所抑制。


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说明书

参考文献

本产品可用于的实验

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