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CviKI-1

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描述：

识别位点：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:10%

NEBuffer 2:50%

NEBuffer 3:25%

NEBuffer 4:100%

概述

CviKI-1 是具有4种识别序列以及最多 11 个不严格的非同源识别序列 (星号活性) 的限制性内切酶。

来源

重组 E. coli 菌株，包含有从一种小球藻病毒 CA-1A (J.L.Van Etten) 克隆并经修饰的 CviKI 限制性基因。

反应缓冲液

NEBuffer 4。

连接和再切

经过 CviKI-1 10 倍过量消化，> 95% 的 DNA 片段能被连接和再切。

浓度

5,000 units/ml，通过 pBR322 DNA 鉴定。

热失活

80℃ 20 分钟。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项：

1．过夜酶切或添加 20% 的 DMSO 会明显增强 CviKI-1 的星号活性，在这样的条件下，DNA 将被切成小的寡聚体。
2．如下条件可能导致星号活性：低离子强度、高酶浓度、甘油浓度 > 5% 或 pH 值 > 8.0 。