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ADP-Glo? Kinase Assay

 
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运费与支付说明:

1.含干冰类产品有运费;

2. 必须现金付款或有信用额度的会员才可以直接发货,否则需要等待现金付款信息。

其它组分:

ADP-Glo™ Reagent【子货号:V912A,包装:1 x 5ml,,运保温度:-20℃】
Kinase Detection Buffer【子货号:V913A,包装:1 x 10ml,,运保温度:-20℃】
Kinase Detection Substrate【子货号:V914A,包装:1 x 1 each,,运保温度:-20℃】
Ultra Pure ATP, 10mM【子货号:V915A,包装:1 x 500μl,,运保温度:-20℃】
ADP, 10mM【子货号:V916A,包装:1 x 500μl,,运保温度:-20℃】


描述:

说明

 

        ADP-Glo™ Kinase Assay (ADP-Glo™ 激酶检测试剂盒) 是一个发光法激酶检测试剂盒,它检测激酶反应中所形成的ADP;ADP被转化成ATP,然后ATP 再被Ultra-Glo™ 萤光素酶转化成光。发光信号与激酶活性正相关。该试剂盒适合检测化合物对多种纯化激酶活性的影响,使之成为初级筛选和研究激酶作用的选择性的理想工具。ADP-Glo™ 激酶检测试剂盒可用于检测几乎任何可生成ADP的酶( 比如,激酶或ATP 酶) 的活性,ATP 浓度可高达1mM。

        该试剂盒的操作有两个步骤:1) 在激酶反应后,向其中加入一份与激酶反应体系等体积的ADP-Glo™ 试剂,使激酶反应终止,并消耗完剩余的ATP。2) 加入激酶检测试剂,它在使ADP 转化成ATP的同时,还使用偶联的萤光素酶/ 萤光素反应来检测新合成的ATP。

        ADP-Glo™ 激酶检测试剂盒具有很宽的动态范围,即使当ATP到ADP 的转化率很低的时候,也能产生强信号;非常适合于低活性激酶,比如受体酪氨酸激酶。该试剂盒产生的假阳性率最低,Z` 值大于0.8。
        请浏览www.promega.com/kinase/ 查看我们提供的多种激酶酶系统。

 

 

特点

 

• 在ATP 转化率低时,亦可得到高强度信号:可以检测到更接近于真实生理条件的激酶活性。

• 灵敏:对低浓度ADP 灵敏,因此比其它试剂盒需要更少的酶。

• 通用:几乎可用于任何激酶,在实验室内部就能筛选范围更广泛的激酶,减少了对费用昂贵的、外包激酶选择性研究的依赖。

• 准确:可准确检测多种起始ATP 浓度;检测到的活性能够真正反映激酶的活性,并得到IC50s 值,可与放射性检测方法相媲美。

• 可检测宽范围的ATP 水平:可在ATP 浓度高达1mM 时使用,这对于对ATP 具有高Km 值的激酶很重要。

• 稳定的发光信号:可以批量进行微孔板操作,无需严格计时的孵育,很灵活。

 

 

 

 

 

储存条件

 

将整个系统储存于-20℃。使用前,将所有组分在室温完全融化,充分混匀后备用。将激酶检测试剂( 激酶检测缓冲液+ 底物) 制备好后,分装成小份,储存于-20℃。

 

操作概况

 

ADP-Glo 激酶检测试剂盒的原理。 该试剂盒分两步进行操作: 1 )在激酶或 ATP 酶反应后,加入 ADP-Glo™ 试剂以终止激酶反应并消耗完剩余的 ATP , 2 )加入激酶检测试剂将 ADP 转化成 ATP ,使用偶联的萤光素酶 / 萤光素反应检测新合成的 ATP 。

http://www.promega.com/figures/8000/8051maw2.gif

 


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