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GoTaq? Hot Start Green Master Mix

 
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其它组分:

GoTaq® Hot Start Green Master Mix, 2X【子货号:M512C,包装:1 x 25ml,,运保温度:-20℃】
Nuclease-Free Water【子货号:P119C,包装:1 x 25ml,,运保温度:-20℃】


描述:

 

说明

 

GoTaq® Hot Start Polymerase (GoTaq® 热启动DNA 聚合酶)内含高性能的GoTaq® DNA 聚合酶,并具有专利抗体与之结合从而阻断其活性。在最初的变性步骤中,当扩增反应体系被加热到94-95℃ 2 分钟时,聚合酶活性得到恢复。聚合酶活性在低于70℃时消失或活性最低,实现热启动PCR。GoTaq® 热启动DNA 聚合酶具有5` → 3` 核酸外切酶的活性。随同酶一起提供一管25mM MgCl2,可以优化反应体系中镁离子浓度。同时也提供5X Green GoTaq®  FlexiBuffer 和5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer。这些缓冲液中含有一种能增加样品密度的化合物,使得样品很容易沉进琼脂糖胶加样孔中。绿色缓冲液含有两种染料( 蓝色和黄色),在电泳时会分开以监测迁移进度。用绿色缓冲液可在扩增后直接进行电泳分析,而无色的缓冲液用于染料可能会干扰扩增后分析的情形,如荧光或吸光度分析。GoTaq®Hot Start Master Mixes (GoTaq®热启动混合母液) 是预混的、即用的溶液,包含高性能的GoTaq® Hot Start Polymerase(GoTaq®热启动聚合酶)、镁离子溶液、dNTP 和缓冲液。在室温下,不到1分钟的时间里即可被组装、启动;您只需加入模板、水和引物。我们提供绿色或无色的反应缓冲液,也可作为上样缓冲液,可让您实现将PCR 产物从PCR 仪中取出,直接进行凝胶分析。GoTaq® Hot Start Master Mixes 中的热启动聚合酶是基于抗体的,可提供更好的特异性和灵敏度,并且方便、易于使用,并节省时间。

 

GoTaq® Hot Start Green Master Mix是预先混合的、即用型溶液,含有GoTaq® 热启动酶、dNTPs、MgCl2和反应缓冲液,这些组分均为最佳浓度,用以通过PCR反应对DNA模板进行有效扩增。GoTaq® 热启动酶内含高性能的GoTaq® DNA聚合酶,还含有专利抗体与之结合从而阻断聚合酶的活性。在初始变性步骤中,当扩增体系在94-95℃被加热2分钟时,聚合酶活性得到恢复。由于聚合酶活性在低于70℃时被抑制,这使得在室温组建反应的热启动PCR可以实现。因为热启动PCR可以消除或最大限度地减少引物二聚体和二级产物,所以在扩增一些靶标时非常有利。在有些情况下,热启动PCR还可以提高产率。GoTaq® Hot Start Green Master Mix 含有两种染料(蓝色和黄色),在电泳时分离,便于监测电泳的进程。使用GoTaq® Hot Start Master Mix 组装的反应具有足够的密度,可以直接加样到琼脂糖凝胶上。GoTaq® 热启动酶具有5’-3’核酸外切酶活性。
如果PCR扩增反应后用琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色来分析,那么推荐使用GoTaq® Hot Start Green Master Mix。如果扩增后下游应用需检测吸光值或者进行荧光激发,那么不推荐使用GoTaq® Hot Start Green Master Mix,因为预混液中的染料可能会干扰这些应用。GoTaq® Hot Start Green Master Mix中的染料在225-300nm有吸收,使测定DNA浓度的A260读数不可靠。这些染料在488nm以及600-700nm之间有激发峰,与荧光检测仪器中常用的激发波长有重合。然而,对一些仪器(如:使用488nm激发波长的的荧光胶扫描仪)来说,这种干扰极小。原因是:在488nm波长有吸收的是黄色染料,而黄色染料比引物(<50bp)迁移得快。胶经扫描后会在引物下面有浅灰的染料前沿(与黄色染料前沿对应)。
GoTaq® Hot Start Green Master Mix, 2X: 含有GoTaq® 热启动酶、2X绿色GoTaq® 反应缓冲液 (pH 8.5)、400μM dATP、 400μM dGTP、400μM dCTP、 400μM dTTP和 4mM MgCl2。绿色GoTaq® 反应缓冲液使用专利的配方,其中含有能够增加样品密度的化合物以及黄色和蓝色的染料(当用琼脂糖凝胶电泳分析反应产物时可作为上样染料)。在1% 的琼脂糖凝胶中,蓝色染料与3–5kb DNA 片段的迁移速度相同。黄色染料比引物(<50bp)迁移得快。

特点

 

• 增加产量,灵敏度和特异性:GoTaq® DNA 聚合酶扩增的强劲性能和高灵敏度已经得到证实,热启动的加入产生更优异的结果。

• 易于使用:反应体系的组装可在室温下完成,无需在冰上操作。

• 高产率:酶激活仅需2 分钟,确保了酶的最大活性的发挥。

• 特异性更高:非特异扩增和引物二聚体产生的概率降至最低。

• 提高了生产力:从PCR 直接到凝胶分析。GoTaq® Reaction Buffer 既充当反应缓冲液,又可以用作凝胶上样溶液。

• 方便:反应在一个试管内即可完成,仅需一次加样。使用master mixes 时,只需要加入模板和引物。

• 最佳设置:根据模板的不同调节反应体系中镁离子的浓度。

 

 

 

 

   

 

 


注意事项:

 

储存条件  

将所有组分储存于-20℃。

 


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