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HaloTag? Protein Purification System Sample pack

 
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1.含干冰类产品有运费;

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其它组分:

TEV Protease for use with HisLink™ Resin【子货号:V109A,包装:1 x 200μl,,运保温度:–20℃】
HisLink™ Protein Purification Resin【子货号:V882D,包装:1 x 0.5ml,,运保温度:4℃】
HaloLink™ Resin【子货号:G1913,包装:1 x 2.5ml,,运保温度:4℃】


描述:

说明

 

HaloTag® Protein Purification System (HaloTag®蛋白纯化系统)被设计用于纯化HaloTag®融合蛋白,HaloTag® 是一种新型蛋白标签,能够增强重组蛋白的表达产率和可溶性。HaloTag® 技术能够将目的蛋白以共价结合的形式、高效并特异地捕获到HaloLink™ 树脂上,因此克服了其它使用亲和标签进行蛋白纯化的方法所带来的、基于平衡反应的限制因素( 例如,低水平表达蛋白的低效捕获和冲洗纯化树脂导致的蛋白流失)。

可利用HaloTag® 技术快速、方便地检测HaloTag® 融合蛋白,也可监测HaloLink™ 树脂对蛋白的固定化效率,这是通过使用HaloTag® TMR 荧光配基进行标记,然后再进行SDS-PAGE 而实现的。实验指南可在下述技术手册中找到:HaloLink™ Resin 技术手册 #TM250, HaloLink™ Protein Array 技术手册 #TM310, 和HaloCHIP™ System 技术手册 #TM075。实验过程概述

HaloTag® 蛋白是一个34kDa 的突变水解酶,通过一个被固化的氯化烷配基与HaloLink™ 树脂发生共价结合。TEV 蛋白酶可从HaloLink™ 树脂上将目的蛋白切下。TEV 蛋白酶具有一个N 端HQ标签,可以使用HisLinkTM 树脂与目的蛋白分离开,这样就得到了纯化的目的蛋白。编码HaloTag® 蛋白并能够在大肠杆菌中使目的蛋白达到最优表达的最适载体是pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector(G2751) 和pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector (G2681)。这些载体可以单独购买。

 

特点

 

•  与His-Tag, GST 和MBP 亲和标签相比较,本系统产量大、纯度高、能够获得具有功能的可溶性蛋白:HaloLink™ 树脂以共价结合的方式捕获和固定HaloTag® 融合蛋白,特异性高。

 在原核、哺乳动物细胞和无细胞表达系统中,目的蛋白的表达得到增强:蛋白以HaloTag® 融合蛋白的形式表达。

 纯化表达量少的融合蛋白:HaloLink™ 树脂能快速、特异性地以共价结合的方式捕获HaloTag® 蛋白,这是一个非平衡过程。

 使用TEV 蛋白酶剪切,可高效回收目的蛋白:TEV 蛋白酶剪切HaloTag® 蛋白和目的蛋白之间的连接肽段,其识别位点已经经过优化。由于是共价连接,HaloTag® 蛋白仍固定在树脂上。

 节省时间:仅使用一种与下游应用兼容的缓冲液,即可支持所有的纯化步骤。

 使用HaloTag® 荧光配基可轻松实现凝胶内检测和蛋白表达水平的定量:HaloTag®蛋白- 配基相互作用非常稳定,可以在含有SDS 的样品缓冲液中煮沸,并直接使用SDS-PAGE 分离。

 


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参考文献

本产品可用于的实验

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