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cAMP-Glo? Max Assay

 
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其它组分:

Protein Kinase A【子货号:V135B,包装:1 x 200μl,,运保温度:-20℃】
cAMP-Glo™ ONE Buffer【子货号:V166B,包装:1 x 20ml,,运保温度:-20℃】
MgCl2, 1M【子货号:V330B,包装:1 x 5ml,,运保温度:-20℃】
cAMP, 1mM【子货号:V642A,包装:1 x 500μl,,运保温度:-20℃】
Kinase-Glo® Substrate【子货号:V672B,包装:1 x 1 vial,,运保温度:-20℃】
Kinase-Glo® Buffer【子货号:V673B,包装:1 x 100ml,,运保温度:-20℃】


描述:

说明

 

        cAMP-Glo™ Max Assay (cAMP-Glo™ Max 检测试剂盒) 是一种均质的、利用生物发光原理检测细胞内环腺苷酸(cAMP) 水平的高通量方法。若某种化合物能调节与腺苷酸环化酶偶联的G 蛋白偶联受体(GPCR),则会明显地改变细胞内的cAMP 水平。cAMPGlo™ Max Assay 用于监测细胞内的cAMP 水平在以下应答反应中的改变:激动剂、拮抗剂、及受试化合物对GPCR 的效应。这种检测方法的原理是:cAMP 激活蛋白激酶A(PKA) 全酶的活性,降低ATP含量,从而引起ATP 偶联的萤光素酶反应的光信号降低。

        cAMP-Glo™ Max Assay 将裂解缓冲液与cAMP 反应缓冲液合二为一,成为cAMP-Glo™ ONE Buffer (cAMP-Glo™ ONE 缓冲液)。这种新的规格简化了实验操作过程,减少了完成检测所需的时间。新的ONE Buffer 以5 倍浓度提供,为细胞培养液的起始体积提供更多的灵活性。

        cAMP-Glo™ Max Assay 可在96 孔、384 孔和1536 孔板中进行检测。用一种测试化合物对细胞进行适当时间的诱导,可以调节cAMP 水平。诱导后,裂解细胞,释放的cAMP 激活试剂中的蛋白激酶A( 图1)。然后加入Kinase-Glo® Reagent 终止PKA 反应,并用萤光素酶反应检测剩余ATP。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。发光信号的半衰期超过4 个小时,使得研究人员有足够的时间来读数,实验用的发光检测仪也不需要带有进样器。

 

特点

 

快速,易用
      • 改进的性能——裂解和cAMP 检测过程合二为一(cAMP-Glo ONE Buffer)。
      • ONE Buffer —— 5 X 的缓冲液为细胞培养液的起始体积提供了更多的灵活性。
      • 检测可在大约30 分钟内完成。

优良的信噪比
      • 在所有的检测cAMP 的试剂盒中,信号/ 背景的比率最高。
      • 信号/ 背景的比率>200 (cAMP),>15 ( 细胞)。
      • 体系易于扩展为1536 孔板或更多。

行之有效的发光技术
      • 由Ultra-Glo™ 重组萤光素酶驱动。
      • 无荧光化合物的干扰。
      • 无放射性。

 


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参考文献

本产品可用于的实验

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