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NAD/NADH-Glo? Assay

 
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其它组分:

Reductase【子货号:G884A,包装:1 x 55μl,,运保温度:-20℃】
Reductase Substrate【子货号:G885A,包装:1 x 55μl,,运保温度:-20℃】
NAD Cycling Enzyme (lyophilized)【子货号:G887A,包装:1 x 1 vial,,运保温度:-20℃】
NAD Cycling Substrate【子货号:G888A,包装:1 x 1.25ml,,运保温度:-20℃】
Luciferin Detection Reagent【子货号:V859A,包装:1 x 1 each,,运保温度:-20℃】
Reconstitution Buffer【子货号:V865A,包装:1 x 10ml,,运保温度:-20℃】


描述:

说明

 

NAD/NADH-Glo ™ Assay 是一种均质的化学发光检测试剂盒,能够检测总的氧化型和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸( NAD + 和 NADH ),并确定 NAD + 和 NADH 在生物样品或特定酶学反应中的比值。 NAD 循环酶用于将 NAD + 转换为 NADH 。在 NADH 存在时,试剂盒所提供的还原酶将 proluciferin (还原酶底物)还原成萤光素。萤光素通过 Ultra-Glo ™重组萤光素酶定量,反应产生的光信号正比于样品中的 NAD + 和 NADH 的量。 NAD 循环酶和还原酶所驱动的 NAD + 和 NADH 循环增加了检测的灵敏度和选择性,使得试剂盒只检测非磷酸化的 NAD + 和 NADH ,而不会检测磷酸化形式的 NADP + 和 NADPH 。

NAD 循环酶、还原酶和萤光素酶反应是通过将等体积的 NAD/NADH-Glo ™ Detection Reagent 加入 NAD + - 或 NADH- 样品中而被启动,检测试剂中包含 NAD 循环酶和底物、还原酶、还原酶底物和 Ultra-Glo ™ rLuciferase ,同时检测试剂中存在的去污剂可将细胞裂解,这样通过加入单一试剂即可检测多孔板中细胞内总 NAD + 和 NADH 的含量。另外,我们也提供了可单独测量 NAD + 和 NADH 、计算 NAD + 和 NADH 比例的操作手册。简单的“加样 - 混合 - 检测”操作方案和灵活、可扩展的检测方法使得 NAD/NADH-Glo ™ Assay 非常适合高通量筛选小分子化合物对 NAD 和 NADH 水平的影响。

 

特点

 

• 高灵敏度 :可直接检测细胞孔中总 NAD+ 和 NADH 含量,对细胞数量要求更少,无需样品制备。

• 一步法、均质检测 :只需在 96 或 384 孔细胞培养板中加入单一检测试剂,即可直接检测总 NAD + 和 NADH 。另外还提供简单的细胞培养板内分别测定 NAD+ 和 NADH 的操作方案。

• 线性范围宽 :可检测 10nm 至 400nm 的 NAD + 或 NADH 。该试剂盒检测 100nM 的信号值高于背景值五倍以上,且 window (最大信噪比)≥ 100 。

• 易于自动化 :操作方案兼容自动化和高通量检测。反应体系可调,支持 96 、 384 和 1536 孔板检测。

• 可靠、具有良好的可重复性 : NAD/NADH-Glo ™ Assay 在通常实验中的 Z` 因子值 >0.7 。

 

 


注意事项:

G9071 contains sufficient reagents to perform 100 reactions in 96-well plates (100μl of sample + 100μl of NAD/NADH-Glo™ Detection Reagent), 400 assays in 384-well plates (25μl of sample + 25μl of NAD/NADH-Glo™ Detection Reagent) or 2,000 assays in low-volume 384-well plates (5μl of sample + 5μl of NAD/NADH-Glo™ Detection Reagent). Assay volumes can be varied depending on plate format as long as a 1:1 ratio of sample to NAD/NADH-Glo™ Detection Reagent is maintained.


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参考文献

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