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NEBNext dsDNA Fragmentase

 
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描述:

特性

■  为新一代测序制备 dsDNA 片段
■  为构建文库制备 dsDNA 片段

Fragmentase 在制备 100-300 bp 片段时比 nebulization 更有效。

概述

NEBNext® dsDNA Fragmentase™ 是时间依赖型酶,能根据不同作用时间将 dsDNA 切割成 100-800 bp 片段。NEBNext® dsDNA Fragmentase™ 由两种酶组成,一种酶能切刻 dsDNA,另一种酶能识别切刻处并在对链进行切割,产生 dsDNA 片段。所得DNA 片段含有极短突出碱基,5' 含磷酸基,3' 含羟基。经过文库制备及测序验证,NEBNext® dsDNAFragmentase™ 具有随机切割特性。通过比较使用该酶与使用机械法制备的基因组 DNA,测序结果没有显示偏嗜性,测序覆盖也无区别。

来源

NEBNext® dsDNA Fragmentase™ 来源于两种不同 E.coli:一种融合表达有 MBP 和创伤弧菌核酸酶突变蛋白质 (Vibrio vulnificus nuclease mutant protein ) ,另一种融合表达有 MBP 和T7 核酸内切酶突变蛋白质。

反应条件

1X NEBNext dsDNA Fragmentase ReactionBuffer,加入 100 μg/ml BSA,37℃ 温育。

1X NEBNext dsDNA Fragmentase Reaction Buffer

20 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
50 mM NaCl
0.15% Triton X-100
pH 7.5 @ 25°C

随酶提供

10X NEBNext dsDNA Fragmentase Reaction Buffer
100X BSA (100 mg/ml)
E. coli DNA Ligase for Fragmentase

热失活

在有 50 mM DTT 的条件下,65℃ 加热 15分钟。


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参考文献

本产品可用于的实验

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