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HpyCH4III

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描述：

识别位点：

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1:100%

NEBuffer 2:50%

NEBuffer 3:25%

NEBuffer 4:100%

来源

重组 E .coli 菌株，包含有从 Helicobacter pyloriCH4 (S A Thompson) 克隆的 HpyCH4III 基因。

反应缓冲液

NEBuffer 4。

连接和再切

经过 HpyCH4III 5 倍过量消化，大约 50% 的 DNA 片段能被连接，连接片段中 > 95% 能被再切。

浓度

5,000 units/ml，通过 λ DNA 鉴定。

热失活

80°C 20 分钟。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项：

1. Bst4CI 是 HpyCH4III 的完全同裂酶。

2. HpyCH4III 产生的 DNA 片段包含有一个碱基的 3´ 突出端，比平末端更难连接。

3. 建议消化每 μg DNA 底物反应时间不 > 4 小时，加入的酶量不 > 5 个单位。