T4 RNA Ligase 2, truncated

• 产品编号：M0242L      品牌：New England Biolabs       原厂货号：M0242L
• 产品分类：克隆 > 限制性内切酶和连接酶 > 连接酶
• 应用分类：

描述：

特性：

■  将 5' 预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到任何 RNA 3' 末端
■  将单链腺苷化引物连接至小 RNA上，用于 cDNA 克隆文库构建
■  将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建

概述：

T4 RNA 连接酶 2，截短型 (T4 Rnl2 截短型) 可特异性地将 DNA 或 RNA 的预腺苷化 5' 末端连接到RNA 3' 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。T4 Rnl2 截短型的表达来自 E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同，T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5' 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5' 磷酸末端连接到 RNA 的 3' 端。该酶，即Rnl2 (1-249) ，可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

来源：

携带 T4 RNA 连接酶 2 截短型基因的重组 E.coli 菌株。

反应条件：

1X T4 RNA  连接酶反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。

随酶提供的试剂;

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明:

无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义:

200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer

DNA 末端 [通用 miRNA 克隆接头 (NEB#S1315) ]所需的酶量。

5´-FAM- rArGrUrCrGrUrArGrCrCrUrUrUrArUrCrCrGrArGrArUrUrCrArGrCrArArUrA-3´
5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´

浓度:

200,000 units/ml。

热失活:

65℃ 加热 20 分钟。

原厂资料：