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Taq DNA Ligase

 
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描述:

特性:

■  耐热性好

■  可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸

■  可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测(1,3)

■  可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变(4)

概述:“Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性 (1,2)  。

来源:重组 E. coli  菌株,含有从 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因(1) 。

反应条件:

1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25 ℃),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100],45 ℃ 温育。

本酶需 NAD+ 作辅因子,NAD+ 已被添加在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中;

为了延长 NAD+ 的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。

质保声明:Taq DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义:(粘性末端活性单位)
1 单位是指在 50 μl 反应体系中,45 ℃ 反应条件下,15 分钟能使 50% 的 12 bp 粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12 bp 粘性末端来自于 BstEII 消化 1 μg λDNA。

浓度:40,000 units/ml。

热灭活:无


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参考文献

本产品可用于的实验

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