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DYNABEADS M-280 TOSYLACTIVATED 2 ML

 
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描述:

如果想要将抗体、肽、完整蛋白质 和功能性酶共价偶联至磁珠表面,应选择 Dynabeads® Tosylactivated。 最优的抗体方向使这些微珠成为蛋白质和蛋白质复合物免疫沉淀的最佳 选择。

蛋白质复合物免疫沉淀的理想选择:
背景值低,抗体与微珠表面共价连接,使 Dynabeads Tosylactivated 成为蛋白质 和蛋白质复合物免疫沉淀(共免疫沉淀,共-IP)的极佳选择。 温和而快速的微珠磁性 聚集和耗时极短的孵育(可能是由于快速的 表面结合动力学)使 Dynabeads Tosylactivated 成为极不稳定或和/或瞬时 (短暂)蛋白质复合物免疫沉淀的理想 选择。

超快方案:

  • 鉴定蛋白质复合物成员的时间以分钟计而非小时
  • 时间分辨率短,足以鉴定瞬时和不稳定复合物
  • 鉴定长时间方案无法鉴定的结合伴侣
  • 快速方案使已经极低的背景结合进一步降低
  • 信噪比更大


应用:

  • 蛋白质和蛋白质复合物的 IP
  • 将功能性酶偶联至微珠表面进行下游分析
  • 将肽偶联至微珠表面以鉴定结合物


纯化具有以下特点的肽、蛋白质和酶:

  • 瞬时稳定
  • 结构完整
  • 温度稳定性差
  • 具有天然构型且功能完好


偶联过程概要:
通过过夜孵育所选配体和 Dynabeads Tosylactivated 实现共价偶联。 与 Dynabeads Tosylactivated 偶联的配体通常包括肽和蛋白质(例如用于 免疫沉淀或共免疫沉淀的抗体)。 在中性到 高 pH 和 37°C 的条件下进行偶联。我们建议在 pH 8.5-9.5 的条件下进行偶联,但是对于 pH 稳定性差的 配体,偶联可以在 pH 值为 7.4 的其它缓冲液中进行。

配体偶联步骤完成后,Dynabeads Tosylactivated 的实际表面包被即不再具有活性,因此非特异性结合非常低。

关于 Dynabeads:
Dynabeads 是无孔的单分散超顺磁微珠。 它们在溶液中有很强的运动能力,使偶联至微珠的配体可与全部样品持续进行 相互作用。 将试管转移至包含强 磁场的管架(在红色导航条上选择 Brands > Dynal® > Magnets)上,超顺磁微珠将吸附 在管壁上。 强磁场将微珠快速吸附至管壁,因此可以通过吸取 轻松去除全部上清液。 洗涤步骤与此类似。

Dynabeads Tosylactivated 微珠表面特性:

 

  • 对-甲苯-磺酰基 (Tosyl) 基团
  • 疏水、pH 中性
  • 通过伯胺 (NH2) 或巯基 (SH) 基团共价结合


每毫克微珠的结合容量:
随配体而变化,(例如 5-10 µg IgG)


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