p19 siRNA Binding Protein

产品编号：M0310L 品牌：New England Biolabs 原厂货号：M0310L
产品分类：蛋白质检测与分析 > 蛋白质，多肽和酶 > 其它纯化的蛋白及酶
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描述：

特性

■ 与 siRNA 结合效率高

■ 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa，来自于植物香石竹意大利环斑病毒 (CIRV) 。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力，和 3' 末端有 2 个核苷酸突出、5' 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合，结合力取决 RNA 片段大小，而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基，则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时，能抑制 RNAi 作用。

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP (麦芽糖结合蛋白) ，C 末端带有 CBD (几丁质结合蛋白) 。

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化，琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测，无 DNA 或 RNA 污染。

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下，1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。

分子量

67 KDa。

浓度

10,000 units/ml。

注意事项：

General notes:

1X p19 siRNA Binding Buffer:
20 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM TCEP, 0.02% Tween-20 (pH 7.0 @ 25°C)

Usage notes:

p19 siRNA Binding Protein can selectively bind siRNAs in the presence of a 2,000 fold excess of other RNAs.

p19 siRNA Binding Protein does not bind ssRNA.Double-stranded 21 bp RNA with a 2-base overhang and a 5´ phosphate binds the most efficiently. Double-stranded miRNAs with mismatched base pairs will bind with lower affinity.

Due to the difference in molecular weight between p19 siRNA Binding Protein and siRNA, a 10 to 20-fold excess of p19 siRNA Binding Protein is needed.

TCEP (Tris 2-carboxyethyl Phosphine) can be replaced with DTT (dithiotreitol) in the required solutions. However, if DTT is used, it needs to be added separately into the reaction.