GpC Methyltransferase (M.CviPI)

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描述：

识别位点

特性：■  阻止限制性内切酶的切割
■  改变 DNA 的物理特性
■  对 DNA 统一进行 [3H] 标记

概述：GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 能将双链二核苷酸识别序列 5' ...GC...3' 中所有胞嘧啶残基 (C5) 甲基化。

来源：分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株表达小球藻病毒 (Chlorella virus) 的甲基转移酶，该酶与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 组成融合蛋白。

反应条件：1X GC 反应缓冲液 + SAM [50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM DTT (pH 8.5 @ 25℃) ]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸 (SAM，随酶提供) 。37℃ 温育。

注意：MgCl2 并不是必需的辅因子。

质保声明：GpC 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义：1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。

浓度：4,000 units/ml，通过 λDNA 检测。

热失活：65 ℃ 20 分钟。

注意事项：

胞嘧啶残基被甲基化后，可影响 DNA 的物理特性，如：降低 Z-DNA 形成的自由能，增加 DNA 的螺旋程度，改变 DNA 十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。