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实验名称:质粒DNA纯化(CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法)低成本型

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描述:

         用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋,由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后, 超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限,可继续结合更多溴化乙锭,直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别,线状和闭环DNA分了在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同,由此来纯化DNA。

 



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